就DNA探針和RNA探針的比較,DNA探針在雜交過程中會(huì)出現(xiàn)探針雙鏈之間退火的可能,也更傾向于在溶液中形成大分子的探針聚合體,從而影響其滲透能力。而RNA 探針的應(yīng)用,將提高DNA-RNA雜交子的熱穩(wěn)定性。
Tips:RNA探針因其單鏈、高分子結(jié)合力、可適應(yīng)高溫雜交的特性,其檢測(cè)特異性和靈敏度均優(yōu)于DNA探針。常用的RNA探針標(biāo)記方法為構(gòu)建質(zhì)粒后進(jìn)行轉(zhuǎn)率合成。通過PCR擴(kuò)增的方法,可以更方便地進(jìn)行RNA探針的制備;RNA探針合成后,還需驗(yàn)證其對(duì)目標(biāo)片段檢測(cè)的靈敏度和特異性。